iTRAQ蛋白技術服務
iTRAQ蛋白技術服務
iTRAQ蛋白技術服務簡單介紹:
蛋白質組分析(proteomics) 是對生物蛋白組(proteome) 的分析與檢測,蛋白組分析先要將混合蛋白質分離, 分離的主要方法是蛋白雙向電泳。已被分離的蛋白質由質譜分析對其進行鑒定。
的4種同位素標記試劑由4種相對分子質量分別為114、115、116和117的報告基團(reporter group),相對分子質量分別為31、30、29 和28 的質量平衡基團(balance group)以及一個相同的肽反應標記試劑基團(peptide reactive group)組成。不同的報告基團分別與相應的平衡基團相配后,相對分子質量均為145,即等量異位標簽(isobaric tag)。
將蛋白質裂解為肽段,然后用iTRAQ試劑進行差異標記。由于iTRAQ試劑是等量的,即不同同位素在標記同一多肽后在*級質譜檢測,分子量相同,用串聯質譜方法對在*級質譜檢測到前體離子(precursor ion)進行碰撞誘導解離,產物離子通過第二級質譜進行分析。在二級質譜分析過程中,報告基團、質量平衡基團和多肽反應基團之間的鍵斷裂,質量平衡基團丟失,產生低質荷比(m/z)的報告離子。由于二級質譜可分析相對分子質量相差1的報告基團,不同報告基團離子強度的差異就代表了它所標記的多肽的相對豐度。同時,多肽內的酰胺鍵斷裂,形成一系列b 離子和y 離子,得到離子片段的質量數,通過數據庫查詢和比較,可以鑒定出相應的蛋白質前體.
實驗:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
9.
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